Dermatologische Untersuchungen

Die Aussagekraft der möglichen Untersuchungen hängt allerdings stark von der Auswahl des richtigen Probenmaterials, der Art der Probenentnahme und der Aufbereitung des gewonnenen Materials ab (siehe Tab. 1).

Die gewonnene Probe wird mit einem weiteren Tropfen Paraffinöl auf einem Objektträger verteilt, mit einem Deckgläschen versehen und im Mikroskop vollständig durchgemustert (4x- oder 10x-Objektiv mit weggeklapptem oder gesenktem Kondensor).

Zur Diagnose einer Sarcoptesräude stehen außerdem eine PCR aus einem Hautgeschabsel (ohne Paraffinöl) bzw. eine Antikörper-Titer-Bestimmung aus dem Serum zur Verfügung.

Das abgeschabte Material wird sogleich auf einen Objektträger gestrichen und gut mit dem Öl vermengt, weil das Probenmaterial durch die Blutung zu Klumpen gerinnen kann und somit schlechter beurteilbar wird. Mit einem Deckgläschen versehen wird das Material mit dem 4x- oder 10x-Objektiv untersucht. Demodexmilben sind teilweise in großer Anzahl vorhanden und oft auch am Präparat, sofern epilierte Haare dabei sind, noch entlang der Haarwurzeln zu finden.

Neben dem mikroskopischen Nachweis gibt es zur Diagnose der Demodikose auch eine PCR, die alle bei Hund (D. canis, D. injai, D. cornei) und Katze (D. cati, D. gatoi, D. felis) beschriebenen Arten erfasst.

Auch wenn die Farbe schon mehrere Wochen verwendet wird, zeigt v. a. die blaue Lösung als erste schlechtere Färbeergebnisse, die an blassen Präparaten zu erkennen sind. Hier kann vorübergehend durch häufigeres oder längeres Eintauchen der Präparate Abhilfe geschaffen und noch ein annehmbares Färbeergebnis erzielt werden. Spätestens wenn auch nach verlängerten Färbezeiten die Zellen im Mikroskop noch immer blass erscheinen oder bei einer Kontamination mit Bakterien, müssen die Farblösungen jedoch ausgetauscht werden. In dicht abschließbaren Gefäßen (z. B. Harnbecher, dicht schließende Gefrierboxen oder Marmeladengläser) sind die Reagenzien über längere Zeit haltbar als in klassischen Färbewannen. Nach dem Abspülen der Farb-reste mit Leitungswasser werden die Präparate erneut luftgetrocknet. In eiligen Fällen kann das auch in einem Brutschrank geschehen oder der Vorgang durch das Platzieren auf einer warmen Oberfläche (z. B. laufende Laborgeräte) oder mit einem Haarföhn beschleunigt werden. Im Mikroskop wird das Präparat zunächst mit geringer Vergrößerung (10x- oder 20x-Objektiv) gescannt, um aussagekräftige Stellen zu finden und diese werden dann mit hoher Vergrößerung (40x bis 100x, Ölimmersion) eingehend beurteilt.

An schwer zugänglichen Lokalisationen (z. B. Zwischenzehenbereich) oder wenn die Haut so trocken ist, dass am Objektträger kein Material haften bleibt, kann mit der Klebestreifen-Methode gearbeitet werden. Der transparente Klebestreifen wird mehrfach auf das betroffene Hautareal gedrückt, bis ausreichend Material haftet und der Streifen nicht mehr klebt (siehe auch Schritt-für-Schritt-­Anleitung).

Bei jedem Patient mit Verdacht auf eine Hautpilzerkrankung sollten zeitgleich mit der Probenentnahme für die Kultur oder PCR die Haare auch trichoskopisch untersucht werden (siehe Abb. 4). Werden Pilzhyphen im Haar gefunden oder sind die Haarschäfte von kugeligen Pilzsporen umgeben, kann die Diagnose Dermatophytose (Pilzinfektion der Haut) prompt gestellt und die Therapie unverzüglich eingeleitet werden. Eine kulturelle Untersuchung oder PCR ist jedoch immer durchzuführen: Einerseits weil die Pilzelemente im Mikroskop nicht immer gefunden werden, andererseits kann trichoskopisch die Art des Dermatophyten nicht bestimmt werden.

Auch Demodexmilben können mittels Trichoskopie nachgewiesen werden, wenn die Anfertigung eines tiefen Hautgeschabsels aufgrund der Lokalisation (z. B. um die Augen) oder fehlender Compliance des Patienten nicht möglich ist. Die diagnostische Treffsicherheit eines tiefen Hautgeschabsels ist jedoch deutlich höher. Da Demodexmilben direkt im Haarfollikel an den Haarwurzeln leben, können sie oft mit den Haaren ausgezupft werden. Allerdings sollte man die Haut nicht wie beim Geschabsel quetschen, da auf diese Weise die Milben aus dem Haarfollikel gedrückt werden und nicht mehr an der Wurzel der ausgezupften Haare sitzen.

Ein Trichogramm im engeren Sinne (eingehende trichoskopische Untersuchung der Struktur von Haaren) kann vor allem in der Diagnostik von nicht entzündlichen Alopezien – d. h. bei Fellverlust ohne offensichtliche Veränderungen der Haut – hilfreich sein. Mit einer Klemme oder Pinzette, deren Spitzen mit Gummischläuchen überzogen sind, um eine artifizielle Beschädigung der Haare zu vermeiden, werden Haare von veränderten Lokalisationen ausgezupft. Streng genommen sollten 100 Haare mit Paraffinöl parallel auf einen Objektträger gebettet und mit einem Deckgläschen versehen werden. Die Wurzeln, Haarschäfte und die Haarspitzen werden im Mikroskop mit niedriger Vergrößerung (4x- oder 10x-Objektiv) beurteilt. Viele Haarwurzeln im Telogenstadium (Ruhestadium der Haare vor dem Ausfall) weisen auf das Vorliegen einer endokrinen Erkrankung (Hypothyreose, Hyperadrenokortizismus) hin. Missgebildete Haarwurzeln lenken die Verdachtsdiagnose in Richtung einer Follikeldysplasie.

Bei Patienten mit Farbmutanten-Alopezie (Color Dilution Alopecia – CDA bei Tieren mit verdünnter Fellfarbe wie z. B. Silber oder Blau) und Alopezie der schwarzen Haare sind in den Haarschäften Melaninklumpen (siehe Abb. 5) zu finden, die schlussendlich zum Abbrechen der betroffenen Haare führen. Das Aussehen der Haarspitzen liefert wichtige Hinweise darauf, ob eine Alopezie möglicherweise durch Automutilation, d. h. durch Belecken oder Knabbern am eigenen Fell, entstanden ist. Besonders Katzen zeigen ihren juckreizbedingt gesteigerten Putztrieb häufig nicht vor dem Besitzer. Findet man im Trichogramm abgebrochene Haarspitzen und Spliss, kann man davon ausgehen, dass doch eine juckende Erkrankung vorliegt.

Die beimpften Platten werden täglich kontrolliert, um falsch positive Ergebnisse zu vermeiden, die durch die Kultur von Saprophyten/Umgebungspilzen verursacht werden können. Einerseits wird auf das Wachstum von Pilzkolonien geachtet, die im Fall von Dermatophyten weiß sind. Wachsen hingegen Saprophyten, färben sich die Kolonien grau oder grünlich bis schwarz. Außerdem ist es wichtig, einen möglicherweise auftretenden Farbumschlag des Testmediums von Rot auf Gelb zu erkennen. Dermatophyten verursachen schon vor oder spätestens zum Zeitpunkt des Heranwachsens einer Pilzkolonie diesen Farbumschlag, bei Umgebungspilzen erfolgt der Farbwechsel erst Tage nach dem Wachstum der Pilze oder gar nicht. Um die genaue Identität des Pilzes festzustellen, wird mit einem Klebestreifen vorsichtig Material von der Oberfläche der Kolonien entnommen. Auf einen Objektträger wird ein Tropfen Lactophenolblau aufgebracht und der Klebestreifen darüber gelegt. So können im Mikroskop die Makrokonidien der verschiedenen Dermatophyten differenziert werden.